El desafío de Juan Rana es un entremés de Pedro Calderón de la Barca. Esta obra fue escrita especialmente para Cosme Pérez, actor célebre del Siglo de oro.
Cosme, tuvo el apodo de Juana Rana. Según algunos «porque una rana no es carne ni pescado» y parece que esta definición aludía a la presunta homosexualidad del actor, quien fue investigado por la Inquisición por ello. Calderón le rindió homenaje a Cosme escribiendo esta obra, en cuyo título incluye su apodo, y además incluyó a Juana Rana en otros entremeses suyos.
En este entremés se pone en escena un desafío y un duelo. Juan Rana se enfrenta a un adversario para defender el honor de su mujer.
